аЯрЁБс>ўџ &(ўџџџ%џџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџьЅСqПС bjbjt+t+*AAС џџџџџџ]((((( 4 ( jLLLLLLLLhjjjGБ Н Щ$l є` ФэLLLLLэLLLLLLh((LhdhhL@  ЂY ёнР((LИhEVALUATION OF THE MICROGENICS BUPRENORPHINE URINE ASSAY VERSUS LC-ES-MS V. Cirimele, P. Kintz, S. Lohner, B. Ludes Institut de Mщdecine Lщgale, Laboratoire de toxicologie, 11, rue Humann, 67085 Strasbourg Cedex, France Buprenorphine is an analgesic with a long duration of action, 25-40 times more potent than morphine. In France, buprenorphine is proposed as a substitute treatment for heroin addicts under the name SubutexЎ. Since 1996, numerous deaths have been observed with buprenorphine, always in association with psychotropic drugs. Even though confirmation methods such as LC-MS are needed for identification, a rapid and sensitive test like an immunoassay is essential for screening. Recently, Microgenics proposed the Diagnostix SinglestepTM ELISA test for the qualitative and semi-quantitative determination of buprenorphine in urine samples. Twenty Еl of urine are incubated with an enzyme conjugate. After the washing steps, substrate is added for the final color development process. In order to test the capacity of commercial immunoassay to detect buprenorphine, 76 real urine samples were simultaneously screened by the Diagnostix SinglestepTM ELISA test and by our validated procedure for the determination of buprenorphine and norbuprenorphine in urine by HPLC-ES-MS (1). From the 76 urine samples tested, 33 were found positive (43.4%) after ELISA screening (cut-off at 2 ng/ml) and confirmed by LC/MS (buprenorphine 1.2 to 1052 ng/ml) and 37 were found negative (48.7%) by both procedures. For 4 urine specimens, the positive ELISA test was not confirmed by LC/MS (LOQ of 1 ng/ml). Only one urine specimen gave a false negative ELISA test. Spiked urines with norbuprenorphine up to 500 ng/ml lead to the absence of response with the ELISA test (0.3% cross reactivity at 1 mg/L). An enzymatic hydrolysis of the specimens with beta-glucuronidase does not modify the results, indicating that the binding site of the antibody is not linked with the glucuronide. These results support that the Diagnostix SinglestepTM ELISA test of Microgenics can be considered as a screening procedure to detect buprenorphine in urine samples. In the case of a positive ELISA test, a confirmatory analysis is needed. References 1.A. Tracqui, P. Kintz, P. Mangin, HPLC/MS determination of buprenorphine and norbuprenorphine in biological fluids and hair samples, J. Forensic Sci. 1997, 42, 111-4.Keywords: buprenorphine, immunoassay, LC/MS (Vincent.Cirimele@medecine.u-strasbg.fr) HSsлЉЊкяёђїsˆŠ‹‘  м ё ѓ є њ Ќ З a j  ™ Р С ћѕћяћщћясйяћясйяћћясйяћгћгћяШя6B*OJQJhnH 5OJQJ6EHOJQJ6H*OJQJ H*OJQJ 6OJQJ >*OJQJOJQJHsлмш  Н Ќ З К ` a  С ќљљљљљљїљљљљђђфљп$„ž $$–P4жАџщ $$$$Hsлмш  Н Ќ З К ` a  С §ћјјі (PАh. АДA!АŠ"АŠ#Š$Š%АА5А5 [4@ёџ4NormсlnэCJOJQJmHBA@ђџЁBStandardnэ pэsmo odstavce.>@ђ.Nсzev$ 5OJQJ:B@: Zсkladnэ text$OJQJС џџџџС С С GHrsкмчш  ~  МНЋЌЖЗЙК_ a Œ ˜ Р У џџCLS9C:\WINNT\Profiles\cls\Plocha\TIAFT Abstrakta\Cirimele.docCLS5C:\TEMP\uklсdсnэ pro automatickou obnovu Cirimele.asdKlinische ToxikologieF:\prag-maurer\cirimele.doc Maurer HansKC:\HPCHEM\TEMP\AutoWiederherstellen-Speicherung von cirimele-new-for-ct.asd Maurer HansjE:\WORD-DAT\PUBL-VOR\Publ-2001\TIAFT-Prag\CT-Abstracts\prag-ct-revised-versions\cirimele-final-version.doc Maurer HansQE:\WORD-DAT\PUBL-VOR\Publ-2001\TIAFT-Prag\CT-Abstracts\cirimele-final-version.docCLSSC:\WINNT\Profiles\cls\Plocha\TIAFT Lectures\2. Clinical Toxicology\L28_Cirimele.docџ@Hewlett Packard LaserJet 6LLPT1:winspoolHewlett Packard LaserJet 6LHewlett Packard LaserJet 6Lœpc XXA4 џџџџOџџџџџџџџ4џџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџ''''Hewlett Packard LaserJet 6Lœpc XXA4 џџџџOџџџџџџџџ4џџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџ''''€ŒлмС `@G‡ŸTimes New Roman5€Symbol3& ‡ŸArialY New YorkTimes New RomanYM PalatinoTimes New Roman"€ХƒUfƒUfƒUfi ƒЉ€+„rр џџGEvaluation of the Microgenics buprenorphine urine assay versus LC-ES-MSCLSCLSўџр…ŸђљOhЋ‘+'Гй0Є˜шє   ,8 T ` l x„Œ”œтHEvaluation of the Microgenics buprenorphine urine assay versus LC-ES-MSvalCLSLS Normal.dotoCLS2SMicrosoft Word 8.0i@@фЛь№нР@фЛь№нР@фЛь№нРi ўџеЭеœ.“—+,љЎDеЭеœ.“—+,љЎt0 hp|„Œ” œЄЌД М тCLSр 1 HEvaluation of the Microgenics buprenorphine urine assay versus LC-ES-MS Title˜ 6> _PID_GUIDтAN{674AA583-0638-11D5-BF28-0050DA3B9684} ўџџџўџџџўџџџ !"#$ўџџџ§џџџ'ўџџџўџџџўџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџRoot Entryџџџџџџџџ РFРЗДёнРРCa ёнР)€1Tableџџџџџџџџџџџџ WordDocumentџџџџџџџџ*SummaryInformation(џџџџDocumentSummaryInformation8џџџџџџџџџџџџCompObjџџџџjObjectPoolџџџџџџџџџџџџРCa ёнРРCa ёнРџџџџџџџџџџџџўџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџўџ џџџџ РFdokument Microsoft Word MSWordDocWord.Document.8є9Вq